vanslyke定氮法原理
- 2023-07-30 08:36:22
1、vanslyke定氮法原理?凯氏定氮法是通过测出样品中的总含氮量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质的含量,此法的结果称为粗蛋白质含量。
2、原理:有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵。
3、硫酸铵与强碱反应,放出氨。
4、将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定。
5、根据测得的氨量,计算样品的总氮量。
6、、试剂与材料:浓硫酸、硫酸钾-硫酸铜粉末(称取80g硫酸钾和20g硫酸铜(五水),0.3g二氧化硒研细混合)、30%氢氧化钠溶液、2%硼酸溶液、0.01M标准盐酸、混合指示剂(田氏指示剂)储存液(取50ml0.1%甲烯蓝乙醇溶液与200ml0.1%甲基红溶液混合,储存于棕色瓶中备用。
7、克氏定氮法:天然含氮有机化合物(如蛋白质)与浓硫酸共热时分解出氨,氨与硫酸反应生成硫酸铵。
8、在克氏定氮仪中加入强碱碱化消化液,使硫酸铵分解出氨。
9、用水蒸气蒸馏法将氨蒸入硼酸溶液中,然后再用标准稀硫酸酸溶液进行滴定,滴定所用稀硫酸酸的量(mol)相当于被测样品中氨的量(mol),根据所测得的氨量即可计算样品的含氮量。
10、原理是因为蛋白质含氮量通常在16%左右,所以将克氏定氮法测得的含氮量乘上系数便得到该样品的蛋白质含量。
11、又名范斯莱克氨基氮测定法(vanSlykeaminonitrogenmethod),氨基酸含量检测的一种方法。
12、有机伯胺(R-NH可同亚硝酸盐定量发生反应,生成醇和氮气:R-NH2+HNO2---→R-OH+N2↑+H2O天然氨基酸由于带有α-伯氨基,所以可以发生此反应。
13、在标准条件下测定生成氮气的体积,即可计算出相应伯胺或氨基酸的量。
14、vanslyke定氮法是一种测定生物样品中蛋白质含量的方法。
15、其基本原理是利用样品中的蛋白质分子中含有固定比例的氮原子,通过测定样品中的总氮含量来计算蛋白质含量。
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